屎肠球菌临床分离株生物膜形成与毒力基因及ST分型之间的关系

目的 研究临床分离屎肠球菌株生物膜形成与ST分型和毒力基因之间的关系。方法 收集深圳市南山医院2011—2017年临床分离的不重复屎肠球菌共122株,采用结晶紫染色法检测细菌生物膜形成能力,对分离株进行多位点序列分型(MLST)分析, PCR方法检测屎肠球菌临床株毒力基因表面蛋白(esp )、透明质酸酶(hyl )、表面聚集蛋白(asa1 )、明胶酶(gelE )、溶细胞素(cylA )等的分布。结果 122株屎肠球菌生物膜形成阳性率为49.2%,其生物膜形成能力主要表现为弱阳性。屎肠球菌毒力基因检测提示esp 和hyl 检出率分别为39.3%(48/122)和15.6%(19/122),所有菌株未检测到asa1 、gelE 、cylA ;其中esp 阳性与生物膜形成能力相关(P <0.05),而hyl 阳性与生物膜形成能力无相关性(P >0.05)。MLST分型提示屎肠球菌临床株主要为ST78及ST18型,分别为26株及18株,其中ST78与ST18之间生物膜形成能力差异无统计学意义(P >0.05),esp 更常见于ST78分离株。结论 临床分离屎肠球菌生物膜形成能力较弱,其毒力基因esp 阳性更容易形成生物膜,而hyl 与生物膜形成能力无明显相关性,ST78与ST18之间生物膜形成能力无明显差异,esp 更常见于ST78分离株。     

20株临床来源耐药粪肠球菌的21种耐药元件基因检测与分析

目的：调查20株耐药粪肠球菌株可能存在的耐药基因状况和菌株间的亲缘关系。方法：收集2015年1月—2018年12月湖北省江汉油田总医院住院患者分离的20株耐药粪肠球菌株,用PCR法检测1种青霉素耐药基因、4种氨基糖苷类耐药基因、6种大环内酯类耐药基因、1种链阳菌素耐药基因、2种四环素耐药基因、3种万古霉素耐药基因、2种季胺类消毒剂耐药基因、1种可移动遗传元件标志基因,最后对检测结果作样本聚类分析（UPGMA法）。结果：20株耐药粪肠球菌分别检出1~7种耐药元件基因,包括1种青霉素耐药基因、3种氨基糖苷类耐药基因、2种大环内酯类耐药基因、1种四环素耐药基因、2种万古霉素耐药基因、1种可移动遗传元件标志基因。菌株亲缘关系分析可见20株耐药粪肠球菌可分为A、B 2群。B群又可分为B?1、B?2亚群。B?1亚群有2个克隆播散（4号株?14号株?17号株、8号株与11号株）,B?2亚群有1个克隆播散（9号株与12号株）。结论：青霉素耐药基因、氨基糖苷类耐药基因、大环内酯类耐药基因、四环素耐药基因、万古霉素耐药基因和可移动遗传元件是导致本组粪肠球菌耐药的重要原因。     

2009～2013年齐齐哈尔市粪肠球菌基因序列进化研究及耐药性分析

目的研究化脓性胆管炎患者胆汁培养粪肠球菌基因序列,分析其对6种氟喹诺酮类药物的耐药性。方法对2009~2013年齐齐哈尔医学院附属三院ERCP治疗的化脓性胆管炎患者胆汁标本分离的60株粪肠球菌进行基因序列分析,并利用琼脂稀释法检测分离菌对6种氟喹诺酮类药物（FQs）的MIC50,MIC90和耐药率。结果本组粪肠球菌对6种氟喹诺酮类药物耐药率分别为：莫西沙星15.0%,加替沙星18.3%,左氧氟沙星25.0%,氧氟沙星和环丙沙星均为35.0%,诺氟沙星48.3%。粪肠球菌耐药株中的gyrA在喹诺酮类药物耐药决定区的第83位和87位氨基酸发生突变,分别为S83I,E87G。parC第80位氨基酸发生突变S80I,产生对氟喹诺酮类药物耐药。结论莫西沙星和加替沙星对粪肠球菌具有良好的抑制作用,但由于部分粪肠球菌菌株基因已发生突变,其耐药性还需进一步观察,同时还需开发更有效的具有抑制此类细菌DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ的氟喹诺酮类药物。     

饥饿期粪肠球菌生物膜毒力因子明胶酶E表达研究

目的:研究粪肠球菌生物膜形成相关毒力因子明胶酶E(gelE)在饥饿期及药物作用后的表达情况。方法:体外建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型,分别以1%、2.5%、5.25%次氯酸钠溶液作用于各时期粪肠球菌生物膜后,用Real-time PCR对gelE的基因表达相对量进行检测。结果:gelE基因表达相对量,饥饿期高于稳定期及对数期(P<0.05);用药后,3个期gelE基因表达相对量,5.25%次氯酸钠溶液组低于2.5%次氯酸钠溶液组和1%次氯酸钠溶液组(P<0.05)。结论:饥饿期粪肠球菌生物膜形成相关毒力因子gelE较对数期及稳定期表达增强。次氯酸钠浓度依赖性可抑制粪肠球菌毒力因子gelE的表达。     

再治疗根管粪肠球菌生物膜形成与临床表现相关性分析

目的检测粪肠球菌形成生物膜的能力,探讨其生物膜形成能力与临床表现之间的关系。方法采用96孔板法形成生物膜,结合结晶紫染色,检测临床样本中分离的53株粪肠球菌形成生物膜的能力,分析其生物膜形成能力与患牙临床表现之间的关系。结果53株粪肠球菌中,40株（75.47%）具有生物膜形成能力;在患牙的多种临床表现中,瘘道与再治疗根管粪肠球菌生物膜形成具有相关性,结果具有统计学意义（P＜0.05）。结论再治疗根管中,无瘘道的患牙分离出来的粪肠球菌生物膜形成能力强于有瘘道的患牙,临床治疗中应予以注意。     

氯化镧对根管内粪肠球菌抗菌效果的体外实验

目的:研究氯化镧、FC、CP、氢氧化钙丙二醇糊剂4种根管消毒剂对离体牙根管内粪肠球菌的抗菌性能。方法:选取72个新鲜拔除的单根管前磨牙,随机分为4个实验组(氯化镧组、FC组、CP组、氢氧化钙丙二醇糊剂组)、1个阴性对照组和1个阳性对照组,每组12个牙。所有牙清理根管后灭菌,除阴性对照组不感染细菌外,其余各组均建立粪肠球菌感染根管模型。建模后,4个实验组分别在根管内放置氯化镧药液、FC、CP、氢氧化钙丙二醇糊剂;阴性和阳性对照组放置生理盐水,37℃、50 mL/L CO2培养箱内培养。分别于培养后3 d和7 d时,取各组根管内壁牙本质粉末用BHI培养基继续培养72 h,比浊仪检测各样本的浊度。结果:①药物处理第3天时,氯化镧组牙本质小管中残留菌量较阳性对照组少,但高于阴性对照组和FC组、氢氧化钙丙二醇糊剂组(P<0.05),与CP组无显著性差异(P>0.05);②药物处理第7天时,FC组、CP组、氢氧化钙丙二醇糊剂组和氯化镧组4种消毒剂牙本质小管内残留细菌量较阳性对照组有明显减少(P<0.05),与阴性对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:根管内放置氯化镧药液7 d可有效抑制粪肠球菌生长。     

Qualitative comparison of sonic or laser energisation of 4% sodium hypochlorite on an Enterococcus faecalis biofilm grown in vitro

The effectiveness of sonic activation, laser activation and syringe irrigation of 4% sodium hypochlorite in removing an Enterococcus faecalis biofilm was compared. Biofilms were grown in extracted human single rooted teeth using a flow cell apparatus. After 4 weeks' growth, teeth were subjected to each treatment using 4% sodium hypochlorite and radicular dentinal surfaces of the root canals were analysed by scanning electron microscopy. Results showed that sonic activation and syringe irrigation with sodium hypochlorite showed reduced numbers of bacterial cells on the radicular dentine but were not effective in eliminating E. faecalis in the dentinal tubules. Laser activation of sodium hypochlorite resulted in clean dentine walls and undetectable levels of bacteria within dentinal tubules. Qualitatively, sonic or laser activation of 4% NaOCl resulted in greater bacterial reduction compared with syringe irrigation, with laser activation producing the greatest overall reduction.     

Efficacy of Peracetic Acid in Rapid Disinfection of Resilon and Gutta-percha Cones Compared with Sodium Hypochlorite,Chlorhexidine, and Povidone-iodine

Background

The aim of this investigation was to compare the effectiveness of 3% sodium hypochlorite (NaOCl), 2% chlorhexidine, 1% peracetic acid, and 10% povidone-iodine in the rapid disinfection of Resilon (Pentron Clinical Technologies, LLC, Wallingford, CT) and gutta-percha cones contaminated with Enterococcus faecalis and Bacillus subtilis.

Methods

Two hundred fifty-six samples consisting of 128 gutta-percha cones and 128 Resilon cones were used in this study. The materials were tested for disinfection according to the type of solution (3% NaOCl, 2% chlorhexidine, 1% peracetic acid, or 10% povidone-iodine), the time of exposure to each solution (1 or 5 minutes), and the type of microorganisms (E. faecalis or B. subtilis). Subsequent to the disinfection, samples were placed in test tubes containing 10 mL Mueller-Hinton broth and incubated at 37°C for 7 days. All test tubes were observed at 24-hour intervals and visually checked for turbidity, signifying microbial growth.

Results

In this study, 1% peracetic acid showed the best results for both 1 minute and 5 minutes of disinfection, 2% chlorhexidine showed the second best results although it was statistically at par with peracetic acid, and 3% hypochlorite ranked third in disinfection; this was statistically significant when compared with peracetic acid and chlorhexidine. Disinfection by povidone-iodine was the least within all the groups for both contact times although disinfection for 5 minutes showed better results than disinfection for 1 minute for gutta-percha.

Conclusions

The outcome of this study confirmed the efficacy of 1% peracetic acid and 2% chlorhexidine in the rapid disinfection of both Resilon and gutta-percha.     

粪肠球菌对白假丝酵母菌的体外拮抗作用初探

目的:观测粪肠球菌(EF)在体外对白假丝酵母菌(CA)的生长有无抑制作用.方法:采用直接点种法观察抑菌圈,分别采用反点种菌落计数法和液体共培养法,观察在粪肠球菌作用下白假丝酵母菌菌落数量的变化.结果:①EF在CA和TPY软琼脂上未形成清晰的抑菌圈;②在粪肠球菌软琼脂上的白假丝酵母菌菌落数较对照组明显减少(P＜0.05);③与粪肠球菌共培养的白假丝酵母菌菌落数量减少(P＜0.05).结论:粪肠球菌对白假丝酵母菌的体外生长有抑制作用.